菊花B病毒外壳蛋白互作蛋白的筛选
2013-06-14分类号:S436.8
【部门】南京农业大学园艺学院
【摘要】采用PCR扩增菊花B病毒(CVB)外壳蛋白基因的开放阅读框,构建酵母双杂交系统所需的诱饵表达载体pGBKT7-CVBCP,测序验证后转化Y2HGold酵母菌。将酵母菌Y187/pGADT7-cDNA与酵母菌Y2HGold/pGBKT7-CVBCP进行交配转化,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-Gal平板上筛选蓝色阳性克隆并测序pGADT7-cDNA的插入片段。结果表明:诱饵载体表达产物对酵母无毒性作用,且对报告基因无自激活作用。筛选菊花cDNA文库初步得到了与CVB外壳蛋白相互作用的E3泛素连接酶ARIADNE-like蛋白和ATP结合蛋白,为进一步研究CVB外壳蛋白与寄...
【关键词】菊花 菊花B病毒 外壳蛋白 E3泛素连接酶 酵母双杂交
【基金】江苏省科技支撑计划项目(BE2011325); 教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-10-0492); 国家农业科技成果转化项目(2010GB2360063)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
文献传递