建兰花叶病毒南京分离物基因组测定与侵染性克隆构建
2013-06-14分类号:S436.8
【部门】南京农业大学园艺学院 镇江市蔬菜科学研究所
【摘要】以建兰花叶病毒(CyMV)南京分离物侵染本氏烟的叶片为材料,利用RT-PCR扩增CyMV基因组cDNA,并进行测序,得到全长序列(GenBank登录号:JQ860108),然后插入到pCass4-Rz载体中,构建CyMV侵染性克隆载体。序列分析表明,与已报道的石斛兰、蝴蝶兰、香草兰分离物序列同源性高达96%以上,并且具有相同的基因组结构;不同国家和地区的序列进化树分析表明,其与我国台湾地区的病毒分离物亲缘关系最近。侵染性克隆通过农杆菌侵染接种本氏烟,与CyMV分离物具有相同的症状,并可利用RT-PCR检测到其外壳蛋白基因,表明成功构建了具有生物活性的CyMV侵染性克隆。
【关键词】建兰花叶病毒 侵染性克隆 载体构建
【基金】国家自然科学基金项目(31101574); 南京农业大学青年科技创新基金项目(KJ2011008); 镇江农业科技支撑计划项目(NY2011015)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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