农杆菌介导樱桃干腐病菌的遗传转化
2013-08-28分类号:S436.629
【部门】青岛农业大学农学与植物保护学院 山东省植物病虫害综合防控重点实验室
【摘要】以携带潮霉素磷酸转移酶基因的pBIG3C为转化载体,根癌农杆菌EHA105为转化介体,对樱桃干腐病菌LXS230101分生孢子进行转化。结果表明,樱桃干腐病菌的最优转化体系为:α型分生孢子浓度为106个/mL,培养基中添加200μmol/mL乙酰丁香酮(AS),共培养温度和时间分别为25℃和72 h,其转化效率为1×106个α型分生孢子产生686个转化子。随机选取转化子进行PCR和Southern blot鉴定,发现T-DNA已整合进樱桃干腐病菌基因组中;转化子在不含潮霉素的PDA培养基中连续培养5代后,仍表现出对潮霉素的抗性,表明外源基因能在樱桃干腐病菌中稳定遗传。
【关键词】樱桃干腐病菌 遗传转化 转化效率 转化子鉴定
【基金】国家自然基金项目(31000891;31272001); 现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-28); 山东省科技攻关计划项目(2010GNC10918); “泰山学者”建设工程专项经费项目
【所属期刊栏目】华北农学报
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