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人源化抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的原核表达及生物学活性测定

2013-04-10分类号:S188

【作者】徐重新  张存政  张霄  刘媛  黄鹰  刘贤金  
【部门】江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室  南京师范大学生命科学学院/江苏省微生物与功能基因组学重点实验室  
【摘要】利用含有重组噬菌粒的噬菌体直接侵染大肠杆菌(Escherichia coli)HB2151,原核分泌表达了抗苏云金芽孢杆菌(Ba-cillus thuringiensis,Bt)Cry1B毒素蛋白的单链抗体(single chain-variable fragment,scFv),经纯化、鉴定抗原结合活性后,建立了Cry1B毒素蛋白的ELISA检测方法。方法以展示scFv抗体的重组噬菌体感染E.coli HB2151,经PCR和基因测序检测克隆scFv基因片段的完整性,用SDS-PAGE方法检测scFv在E.coli HB2151宿主菌中的表达水平,用ELISA测定法检测scFv的抗原结合活性...
【关键词】Cry1B毒素蛋白  单链抗体  可溶性表达  抗原结合活性
【基金】国家973计划项目(2012CB722505); 国家自然科学基金项目(31272109,31201535)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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