中华绒螯蟹精巢特异表达蛋白DMRT-like:抗体制备及免疫鉴定
2013-01-15分类号：Q511;S917.4
【部门】上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室
【摘要】Dmrt是性别调控因子Doublesex和Mab-3的相关基因,近年报道了中华绒螯蟹EsDmrt-like只在精巢中表达,为了验证EsDMRT-like蛋白是否在中华绒螯蟹精巢中特异表达及其功能,根据中华绒螯蟹EsDmrt-like基因序列,构建重组质粒pET-32a-EsDmrt-like,转化大肠杆菌BL21,经融合表达和SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为46ku。利用Ni柱亲和纯化融合蛋白免疫家兔,制备获得EsDMRT-like多克隆抗体。Western-blotting检测表明该抗体既能特异地识别重组蛋白,又能特异识别精巢中EsDMRT-like蛋白,并...
【关键词】中华绒螯蟹 EsDMRT-like蛋白 原核表达 抗体制备 精巢分化
【基金】国家科技支撑计划项目(2012BAD26B04); 国家教育部博士点科研基金项目(20093104110003); 上海市科委基础重点科研项目(11JC1404600); 国家自然科学基金项目(31272655)
【所属期刊栏目】水产学报
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