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甜高粱4-香豆酸辅酶A连接酶基因(4CL)的克隆、鉴定及时空表达分析

2014-03-29分类号:Q946.5

【作者】周  王玉峰  娄来清  周华  陈素丽  蔡庆生  滕胜
【部门】(1.南京农业大学生命科学学院  江苏南京210095  2.中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所  上海200032)
【摘要】通过对木质素合成途径中关键的限速酶——4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate:CoA ligase, 4CL,EC6.2.1.12)基因克隆,鉴定与时空表达分析来研究甜高粱中4CL基因家族的特性,为今后利用基因工程手段改造甜高粱木质素提供一定的理论依据。搜索NCBI数据库得到高粱中4CL基因家族序列,以甜高粱品种‘大力士’的cDNA为模版克隆得到甜高粱中4CL家族中各蛋白编码序列(CDS),CDS连入表达载体PET51B,转入大肠杆菌表达菌株(BL21)进行诱导表达,镍柱纯化后进行酶活分析。实时定量荧光 PCR(Real-time Quantitative PCR, QPCR)检测甜高...
【关键词】甜高粱  4-香豆酸辅酶A连接酶  木质素  时空表达  类黄酮  酶活力
【基金】国家自然科学基金项目(40971296,31372359);江苏高校优势学科建设工程资助项目
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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