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粟酒裂殖酵母mae1基因的克隆及其在产朊假丝酵母中的整合表达

2012-09-18分类号:TS261.1

【作者】黄鹭强  张丽萍  雷秀清  林志钦  郑宝东  
【部门】福建农林大学食品科学学院  福建师范大学生命科学学院  工业微生物教育部工程研究中心  
【摘要】以粟酒裂殖酵母基因组DNA为模版,逆转录获得cDNA;以cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增,得到苹果酸通透酶(mae1)基因,将其与pMD-18T连接并测序.结果表明cDNA全长为1316 bp,编码438氨基酸,分子质量49ku,与已报道的mae1基因序列的同源性达到99%.mae1与整合型表达质粒pSH47连接后,用重组的表达质粒转化产朊假丝酵母,经PCR验证筛选阳性克隆子.通过对转化子的摇瓶筛选,发现重组子的降酸幅度均大于原始菌株,培养40 h降解了48.6%的L-苹果酸,降解率比原始菌株提高了9.8%.
【关键词】粟酒裂殖酵母  苹果酸通透酶  产朊假丝酵母  整合重组表达
【基金】福建省科技厅资助项目(2009N2002); 福建省教育厅资助项目(JB10017)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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