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鱼类病毒性出血性败血症病毒核蛋白基因的原核表达

2012-06-15分类号:S941

【作者】杜娟  兰文升  刘荭  郑晓聪  陈孝煊  
【部门】华中农业大学水产学院  深圳市外来有害生物重点实验室  深圳出入境检验检疫局  
【摘要】通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获得编码病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus,VHSV)核蛋白基因,将其克隆至原核表达载体pET28a,并在E.coli BL21(DE3)中得到表达,用SDS-PAGE与Western-blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 221bp核蛋白基因片段,诱导表达重组质粒pET28a-N,经SDS-PAGE检测,IPTG终浓度为1mmol/L时,诱导5h蛋白表达量最高,获得的目的蛋白大小与N蛋白的预测分子质量一致,约为48ku。诱导后的菌液进行超声波破碎后,将沉淀和上清...
【关键词】病毒性出血性败血症病毒  核蛋白  基因克隆  原核表达  可溶性蛋白
【基金】质检公益性行业科研专项项目(201010020)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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