扁吻鱼微卫星分子标记的筛选及特征分析
2012-12-28分类号:S917.4
【部门】中国水产科学院黑龙江水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】通过磁珠富集法筛选扁吻鱼的微卫星分子标记。利用限制性内切酶Sau3AI对扁吻鱼的基因组DNA进行酶切,并选取片段大小在250~750 bp间的片段,利用PCR技术进行全基因组扩增,采用生物素标记的(CA)8探针对微卫星片段进行富集。富集后的片段与T载体连接后利用DH5α大肠杆菌进行转化,然后以Sau3AI为引物对菌落进行PCR扩增,扩增后选片段大小符合条件的菌落挑取至测序板,进行测序。结果表明:PCR筛选共获得563个阳性克隆,其中测序192个阳性克隆后发现有53个微卫星序列;序列分析表明,完美型占67.92%,非完美型为22.64%;混合性标记占9.43%。根据测序结果设计微卫星引物24对,...
【关键词】扁吻鱼 微卫星 分子标记
【基金】国家“863”计划项目(2007AA10Z186); 水产分子育种共性技术的建立与应用项目(200903045)
【所属期刊栏目】华北农学报
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