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家蚕类胰岛素相关肽结合蛋白2(BmIBP2)的原核表达与组织特异性分析

2012-12-01分类号:S881

【作者】高坤  邓祥元  朱峰  汪生鹏  钱荷英  郭锡杰  
【部门】江苏科技大学蚕业研究所  中国农业科学院蚕业研究所  江苏科技大学生物与化学工程学院  
【摘要】【目的】从体外表达家蚕中新发现的1个免疫球蛋白超家族成员—类胰岛素相关肽结合蛋白2(BmIBP2),并制备其多克隆抗体,为进一步深入研究BmIBP2的生物学功能奠定基础。【方法】以家蚕中肠的总cDNA为模板,利用普通PCR方法,扩增出BmIBP2基因的成熟肽序列;通过构建重组表达质粒pET-28a-BmIBP2对BmIBP2的成熟肽进行重组表达;制备多克隆抗体,通过免疫共沉淀的方法研究BmIBP2蛋白的组织特异性。【结果】SDS-PAGE电泳分析表达产物发现,重组蛋白rBmIBP2主要以包涵体的形式表达,目的蛋白大小约为30 kD;以兔抗His-tag抗体为一抗进行Western blot检测...
【关键词】家蚕  类胰岛素相关肽结合蛋白2  原核表达  纯化  抗体
【基金】国家自然科学基金项目(30972143)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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