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基于荧光显色的IBV LAMP检测方法研究

2012-09-25分类号:S858.31

【作者】张琳  马利  丁雅苓  逯茂洋  胡北侠  杨少华  张秀美  
【部门】山东省农业科学院畜牧兽医研究所  山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室  山东农业大学动物科技学院  齐鲁制药有限公司  中国农业大学动物医学院  
【摘要】【目的】建立基于荧光显色的可视化禽传染性支气管炎病毒(IBV)环介导等温扩增(LAMP)检测体系,为IBV的快速临床检测提供有力的技术支持。【方法】根据NCBI中收录的IBV 5a+5b基因的8个区域设计了3对LAMP引物,通过对反应体系各组分和条件的优化,建立IBV LAMP检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行验证。分别用SYBR Green I和一定浓度比的钙黄绿素/锰离子混合物作为显色剂,对IBV LAMP检测结果进行可视化判定。应用该检测体系和PCR方法对临床送检的60份样品同时进行检测,比较2种方法的阳性检出率。【结果】成功建立了IBV LAMP检测方法,该方法能够在等温(63℃...
【关键词】传染性支气管炎病毒  环介导等温扩增  荧光显色  钙黄绿素
【基金】现代农业产业技术体系建设专项
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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