利用PRNP~(-/-)羊制备朊蛋白多克隆抗体及其特性分析
2012-04-01分类号:S855.3
【部门】上海转基因研究中心 中国动物卫生与流行病学中心 上海杰隆生物工程股份有限公司
【摘要】【目的】利用朊蛋白双基因敲除(PRNP-/-)羊制备朊蛋白多克隆抗体,并对其特性进行分析。【方法】构建山羊朊蛋白(PrP)原核表达载体,转入大肠杆菌并诱导表达,纯化获得羊PrP;将获得的PrP免疫PRNP-/-山羊,制备朊蛋白特异性的多克隆抗体;并对获得的朊蛋白多克隆抗体进行ELISA及Western-blot检测。【结果】获得了大量的朊蛋白特异性抗血清,间接ELASA检测抗血清中朊蛋白多克隆抗体的效价为25600;Western-blot检测显示所制备抗体不仅可以识别鼠、牛、羊脑组织内源性朊蛋白,而且能识别鼠脑组织内朊病毒。【结论】PRNP-/-转基因山羊可用于制备大量高亲和力朊蛋白多克隆抗...
【关键词】朊蛋白 朊病毒 多克隆抗体 朊蛋白双基因敲除山羊
【基金】国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008-011B); 上海市科委研发基地建设项目(10dz2251700)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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