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兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达

2012-04-10分类号:S852.659.6

【作者】哲名家  张淼涛  云涛  王玢瑸  刘光清  
【部门】西北农林科技大学动物医学院  中国农业科学院上海兽医研究所  浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所  
【摘要】【目的】克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组原核表达质粒pET30a-FUT2。将该重组原核表达质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了FUT2基因,该基因长度为1 044bp。成功构建了原核重组表达质粒pET30a-FUT2,其诱导表达产物分子质量约为45ku;表达的重组...
【关键词】兔病毒性出血症病毒  岩藻糖基转移酶  原核表达
【基金】国家自然科学基金项目(30870114); 浙江省自然科学基金项目(3100396)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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