禽戊型肝炎病毒中国分离株ORF3蛋白的真核表达与抗原性分析
2012-06-01分类号：S852.65
【部门】山东农业大学动物科技学院预防兽医系免疫生物学实验室 西北农林科技大学兽医免疫学研究所/西北农林科技大学动物医学院
【摘要】【目的】为获得禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)中国分离株(CaHEV)ORF3基因重组蛋白,并对其抗原性进行分析【。方法】提取CaHEV总RNA,通过RT-PCR获得ORF3基因,构建重组质粒pFastBac-HTB-ORF3,转座DH10Bac感受态细胞,提取重组杆粒Bacmid-ORF3,转染sf9细胞,用SDS-PAGE、IFA和Western blot对重组蛋白表达进行鉴定。优化表达条件,将纯化的ORF3蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,用制备的多抗分别与截短表达的3段CaHEV ORF3蛋白进行Western blot和ELISA检测,分析ORF3蛋白的抗原表位...
【关键词】禽戊型肝炎病毒中国分离株 ORF3蛋白 真核表达 抗原性
【基金】山东省“泰山学者”建设工程项目(040-72010)
【所属期刊栏目】中国农业科学
文献传递
