抗Luman募集因子N端单克隆抗体的制备及鉴定
2012-11-20分类号:S852.4
【部门】西北农林科技大学动物医学院 农业部动物生物技术重点实验室
【摘要】【目的】制备抗Luman募集因子N端(Luman-recruiting factor N terminal,LRF-N)蛋白的单克隆抗体。【方法】PCR扩增LRF-N端的194bp序列,构建LRF-N重组质粒pGEX-LRF-N,转染BL21(DE3)菌,诱导表达并纯化GST-LRF-N融合蛋白,以其作为抗原免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,免疫4次,每次间隔10d,第4次加强免疫3d后采取小鼠脾脏,分离脾细胞,与SP2/0细胞融合,用ELISA和Western blot进行阳性细胞株的筛选和鉴定,对获得的杂交瘤细胞的细胞核型、分泌稳定性以及所分泌的单克隆抗体进行鉴定。【结果】pGEX-LR...
【关键词】Luman募集因子 pEGX-LRF-N GST-LRF-N重组蛋白 单克隆抗体
【基金】高等学校博士点学科专项科研基金项目(20110204120010)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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