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猪Fc受体γ亚单位基因克隆与原核表达

2012-02-28分类号:S828

【作者】张志远  张继希  徐红运  刘肖萍  卢晓艳  段二珍  夏平安  崔保安  
【部门】河南农业大学牧医工程学院  
【摘要】应用RT-PCR技术从90日龄健康仔猪肺巨噬细胞中克隆出猪Fcγ亚单位的cDNA序列,并将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-FcRγ,成功表达了分子量约为29 kDa的γ亚单位重组蛋白。将重组蛋白FcRγ-His免疫小鼠,制备获得鼠抗FcRγ-His重组蛋白多克隆抗体,将得到的重组蛋白多克隆抗体采用间接ELISA和Western-blotting试验方法检测,ELISA测定多克隆抗体的效价为1∶8 000。Western-blotting结果表明,制备的鼠抗FcRγ-His重组蛋白多克隆抗体可以与重组γ亚单位蛋白进行特异性结合,从而证明重组蛋白具有较好的免疫原性。...
【关键词】猪Fc受体γ单位  克隆  原核表达  多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金项目(31172346)
【所属期刊栏目】华北农学报
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