山羊SOX2多克隆抗体制备
2012-01-01分类号:S827;S852.4
【部门】广西大学动物科学与技术学院
【摘要】【目的】构建山羊Sox2原核表达载体—pRSET-Sox2,并将诱导表达、纯化的His-Sox2融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备Sox2多克隆抗体。【方法】从pMD18T-Sox2载体上以Bam H I和Xho I双酶切截取Sox2片段,然后将其亚克隆到pRSET-A表达载体上,获得pRSET-Sox2重组质粒。转化了pRSET-Sox2的大肠杆菌BL21(DE3),1 mmol.L-1 IPTG 37℃诱导4 h,SDS-PAGE电泳及Western blotting检测融合蛋白表达。相同条件下大量增菌诱导,用Ni-NTA argrose介质分离纯化His-Sox2重组蛋白。将体外复性的融合蛋...
【关键词】Sox2 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 山羊
【基金】广西自然科学基金项目(桂科自0728019,桂科自0991043); 广西亚热带生物资源保护与利用重点实验室开放课题(SB0907)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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