山苍子AFLP反应体系的建立及其引物筛选
2012-04-15分类号:S793.9
【部门】中国林业科学研究院亚热带林业研究所 安徽农业大学生命科学学院
【摘要】通过对山苍子幼嫩叶片、顶芽、花蕾3种组织的DNA提取效果分析和对影响酶切及选择性扩增效果的4个主要因素(酶切时间、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度)的比较研究,建立了适合于山苍子AFLP分析的技术体系。结果表明,山苍子的顶芽是较好的DNA提取材料;山苍子基因组DNA经5 U EcoR I和5 U Mse I酶切1 h即可完全酶切;最佳的选择性扩增体系为20μL反应体系中含有1.0 U rTaq聚合酶、2.0μL 10×PCR缓冲液、1.8μL 25mmol.L-1MgCl2、1.4μL 2.5 mmol.L-1dNTP、100 ng.μL-1引物各1.0μL。使用该反应体系获得了清晰、稳...
【关键词】山苍子 基因组DNA AFLP 多态性引物
【基金】浙江省科技计划项目(2009C32107); 国家林业局重点科研项目(2011-01)
【所属期刊栏目】林业科学研究
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