月季丁香酚合成酶基因RhEGS1的克隆及表达分析
2012-02-01分类号:S685.12
【部门】云南省农业科学院花卉研究所/云南省花卉育种重点实验室
【摘要】【目的】克隆月季丁香酚合成酶基因RhEGS1的全长cDNA序列,分析其序列及表达特征,并对该基因编码的蛋白进行原核表达分析,为深入探讨丁香酚合成酶的生化特性奠定基础。【方法】根据已发表的其它植物EGS基因序列的保守结构域设计简并引物,结合RACE技术,获得RhEGS1的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用半定量RT-PCR对不同组织及不同花发育时期RhEGS1进行表达分析。采用Gateway克隆技术,构建原核表达载体,并进行原核蛋白表达。【结果】月季RhEGS1的cDNA全长为1 207 bp,包含一个927 bp的ORF,编码309个氨基酸。同源序列比对发现RhEGS1与仙女扇的Cb...
【关键词】月季 丁香酚合成酶基因 RT-PCR Gateway克隆 原核表达
【基金】国家自然科学基金项目(31060268); 云南省青年基金项目(2010CD097); 国家“863”计划项目(2011AA100208)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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