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短枝型苹果MdRGL基因的克隆及原核表达分析

2012-04-01分类号:S661.1

【作者】宋杨  张艳敏  刘美艳  王传增  刘金  冯守千  王延玲  陈学森  
【部门】山东农业大学园艺科学与工程学院/作物生物学国家重点实验室  
【摘要】【目的】克隆短枝型苹果(Malus domestica Borkh.)的MdRGL基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,为明确短枝型苹果MdRGL基因与短枝芽变特性之间的关系奠定基础。【方法】采用同源克隆法,以短枝型苹果叶片总RNA为模板,通过RT-PCR获得短枝型苹果MdRGL的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定。将克隆到的短枝型苹果MdRGL克隆到表达载体pGEX-4T-1上,构建融合表达载体pGEX-4T-MdRGL,转化到大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。【结果】从短枝型苹果中克隆到5条MdRGL基因:MdRGL1a/b、MdR...
【关键词】短枝型苹果  DELLA蛋白  基因克隆  序列分析  原核表达
【基金】国家自然科学基金项目(31171932); 国家重点基础研究发展计划项目(2011CB100606)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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