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菊芋ISSR-PCR反应体系的建立与优化

2012-02-28分类号:S632.9

【作者】赵孟良  韩睿  李莉  
【部门】青海省农林科学院菊芋研发中心青海省蔬菜遗传与生理重点实验室  
【摘要】利用正交试验设计的方法,从Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶浓度4因素对菊芋ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度及退火温度进行梯度检测。结果表明:菊芋20μl最佳反应体系包括10×PCR buffer,200μmol/L dNTP,0.5μmol/L引物,1.5 mmol/L Mg2+,1.0 U Taq DNA聚合酶和50 ng模板DNA。这一优化系统的建立,将为菊芋种质资源鉴定及遗传多样性的研究奠定基础。
【关键词】菊芋  ISSR-PCR  优化
【基金】国家大宗蔬菜产业技术体系西宁综合试验站(CARS-25-G-49); 青海省蔬菜遗传与生理重点实验室创新基金(Sc-zdsys-2011-02)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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