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小麦胚乳14-3-3基因的克隆及其重组蛋白的原核表达

2012-05-16分类号:S512.1

【作者】戴双  李豪圣  程敦公  刘爱峰  曹新有  刘建军  宋健民  
【部门】山东省农业科学院  
【摘要】【目的】克隆小麦籽粒胚乳14-3-3基因,并进行体外表达,为进一步研究其对籽粒生长发育的调控作用奠定基础。【方法】根据已有同源基因保守序列,设计插入限制性酶切位点的特异性扩增引物,采用RT-PCR方法扩增发育的小麦胚乳14-3-3基因,克隆测序后转入表达载体,在大肠杆菌中进行表达,并进行纯化。【结果】从开花后灌浆13—15 d的小麦品种济麦22籽粒胚乳中克隆到1个14-3-3基因,序列分析表明为非ε型,含1个777 bp的开放阅读框,编码蛋白259 aa,分子量约29 kD。核苷酸序列分析表明与小麦、水稻、玉米、大麦、大豆等主要农作物和模式植物拟南芥的14-3-3基因有较高的同源性,最高达98...
【关键词】小麦  14-3-3蛋白  基因克隆  重组蛋白  原核表达
【基金】国家自然科学基金(30700492;31171551); 现代农业产业体系建设专项(CARS-03-1-8); 转基因生物新品种培育科技重大专项(2011ZX08002-003); 国家科技支撑计划(2011BAD07B02-3;2011BAD35B03); 山东省农业良种产业化工程项目
【所属期刊栏目】中国农业科学
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