蚊虫乙酰胆碱酯酶的真核表达、纯化及活性测定
2012-08-15分类号:S482.33
【部门】华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理国家重点实验室
【摘要】利用Trizol法从尖音库蚊中提取总RNA,构建cDNA文库,并克隆出乙酰胆碱酯酶外显子序列;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对蚊虫乙酰胆碱酯酶进行真核表达,并利用Ni-琼脂糖对酶进行纯化。采用SDS-PAGE对纯化产物进行检测,结果表明得到了纯度较高的乙酰胆碱酯酶。参照Ellman法对酶的活性进行测定,结果显示纯酶的活力为2.219×10-4 mol/(min.g)。
【关键词】有机磷农药 乙酰胆碱酯酶 昆虫杆状病毒表达系统 纯化酶 生物传感器
【基金】国家“863”高技术研究发展计划项目(2009AA06A417)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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