抗噻菌灵单克隆抗体的制备及异源IC-ELISA检测方法的建立
2012-01-30分类号:S481.8
【部门】南京农业大学植物保护学院/农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室
【摘要】为建立噻菌灵酶免疫检测方法,制备3种噻菌灵的半抗原(H1、H2和H3)。利用活泼酯法制备免疫抗原H1-BSA、H3-BSA和包被抗原H1-OVA、H2-OVA、H3-OVA。采用杂交瘤细胞融合方法获得4株稳定分泌抗噻菌灵单克隆抗体的细胞株,分别命名为1-4G9、1-6D3、3-1F9和3-5D4。采用间接竞争酶联免疫法(IC-ELISA),将上述4株抗体分别与3种包被抗原进行组合,从中选择出一个最优组合:H3-OVA/1-6D3。据此建立的异源IC-ELISA检测方法对噻菌灵的IC50为10.9μg.L-1,检测限(IC10)为2.2μg.L-1,与3种噻菌灵类似物的交叉反应率均小于0.1%;...
【关键词】噻菌灵 单克隆抗体 IC-ELISA HPLC
【基金】国家科技支撑计划项目(2009BADB9B03); 国家863计划项目(2006AA102447)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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