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苏云金杆菌Cry8Ea2蛋白的分离纯化及生物活性测定

2012-12-28分类号:S476.1

【作者】王伟  郭巍  徐大庆  孙伟明  刘大群  李瑞军  
【部门】河北农业大学生命科学学院  河北农业大学植物保护学院河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心  国家北方山区农业工程技术研究中心  
【摘要】Cry8Ea2蛋白是一种新型苏云金杆菌杀虫晶体蛋白。通过穿梭载体pSXY422b将cry8Ea2导入Bt无晶体突变菌株中,获得工程菌HD8Ea2。Cry8Ea2蛋白在工程菌中获得表达。通过分子筛层析,成功获得纯化的130 kDa活性毒素蛋白。用改进的生物活性测定方法进行Cry8Ea2蛋白对华北大黑鳃金龟和暗黑鳃金龟一龄幼虫的杀虫活性测定,LC50分别为0.267 9μg/mL和0.071 9μg/mL。研究首次发现Cry8Ea2蛋白对华北大黑鳃金龟具有较高毒力,拓展了该蛋白的杀虫谱,为转基因工程提供了新资源。
【关键词】苏云金杆菌  cry8  穿梭载体  蛋白纯化  生物活性测定
【基金】国家现代农业(花生)产业技术体系项目; “973”计划项目(2009CB118902)
【所属期刊栏目】华北农学报
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