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草莓镶脉病毒外壳蛋白的原核表达及多抗血清制备

2012-11-30分类号:S436.68

【作者】江彤  杨友志  丁菲  蒋磊  李祥宇  邓竹根  谢朝阳  宋培培  
【部门】安徽农业大学植物保护学院  德州经济开发区东艺园林有限公司  山东省平度市农业局  
【摘要】PCR扩增得到了草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的外壳蛋白(coat protein,cp)基因,将SVBV cp基因克隆到原核表达载体pET-32a上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用终浓度为0.05 mmol·L-1的IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳及Western-blot分析表明,SVBV cp基因在大肠杆菌中得到了融合表达。利用Ni2+-NTA亲和树脂纯化重组融合蛋白,免疫家兔获得了重组蛋白的多抗血清。以此多抗血清建立了Dot-ELISA检测方法,结果表明,制备的特异性多抗血清可以快速检测出感病草莓样品中的SVBV。
【关键词】草莓镶脉病毒  外壳蛋白  原核表达  多抗血清
【基金】国家自然科学基金项目(30740033); 安徽省科技厅自然科学基金项目(11040606M68); 安徽省教育厅自然科学基金重点项目(KJ2011A120,KJ2012A113)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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