利用RNAi技术沉默麦长管蚜与桃蚜细胞色素P450
2012-09-01分类号:S435.122
【部门】西北农林科技大学生命科学学院 中国农业科学院作物科学研究所
【摘要】【目的】通过体外饲喂双链RNA(dsRNA),利用RNAi技术沉默麦长管蚜和桃蚜体内细胞色素P450。【方法】采用PCR克隆获得麦长管蚜和桃蚜体内细胞色素P450片段;利用双链RNA合成试剂盒合成麦长管蚜和桃蚜细胞色素P450保守序列的dsRNA;在蚜虫人工饲料中,分别加入终浓度为0、3、5和7.5 ng.μL-1的dsRNA,每个试验组设置3个重复,分别于饲喂后2天、4天、6天、8天统计蚜虫的存活数;利用实时荧光定量PCR技术分析饲喂后目标基因的表达抑制情况。【结果】从麦长管蚜与桃蚜的cDNA中分别克隆细胞色素P450,所克隆片段同源性为90.1%,发现随着dsRNA浓度的增大,麦长管蚜和桃...
【关键词】麦长管蚜 桃蚜 细胞色素P450 RNA干扰 双链RNA
【基金】转基因专项项目(2011ZX08002-001)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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