二价核酶基因构建及对PLRV负链靶序列的体外切割研究
2012-04-28分类号：S432.41
【部门】青岛农业大学农学与植保学院 内蒙古大学生命科学院 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室
【摘要】根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)中国分离株(PLRV-Ch)复制酶基因负链RNA的二价核酶序列。将该核酶基因克隆到pGEM-4Z中,构建成体外转录载体pGEM-4ZDR;同时将包含核酶切割识别位点的PLRV-Ch复制酶基因cDNA近5'端的874 bp片段反向插入到pGEM-4Z中,构建了体外转录载体pGEM-4ZR5。以线性化的重组质粒pGEM-4ZDR和pGEM-4ZR5为模板,在T7 RNA聚合酶的作用下,分别转录获得核酶RNA和PLRV-Ch复制酶基因5'端负链RNA底物片段。将以上2种RNA...
【关键词】二价核酶 马铃薯卷叶病毒 复制酶基因 体外切割
【基金】国家科技支撑计划项目(2007BAD49B02-6); 青岛农业大学人才基金(630915)
【所属期刊栏目】华北农学报
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