人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因腺病毒载体的构建及包装
2012-07-10分类号：Q782
【部门】西北农林科技大学动物科技学院
【摘要】【目的】构建能够表达人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的腺病毒。【方法】通过对PCI-neo-hTERT质粒的改造,依次构建出JMB293-hTERT、pAdTrack-hTERT载体,将pAdTrack-hTERT经PmeⅠ线性化后与pAdEasy-1载体共转化到BJ5183细菌中进行重组,经卡那霉素抗性筛选获得重组腺病毒载体pAdEasy-hTERT。将pAdEasy-hTERT PacⅠ酶切线性化并回收后,转染HEK293人胚肾细胞,培养7d后,收集细胞并反复冻融,收集细胞裂解液;反复扩增3次后,测定重组hTERT腺病毒的滴度。【结果】①利用酶切连接的方法得到了穿梭载体pAdTrack-...
【关键词】人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因 重组腺病毒 细胞永生化
【基金】国家“863”高技术研究与发展计划项目“多位点基因安全转移技术”(2009AA10Z110)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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