硫化叶菌超表达载体构建及Mre11的表达
2012-06-15分类号:Q78
【部门】华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室
【摘要】利用araS启动子并在穿梭载体pZC1及pEXA的基础上构建硫化叶菌超表达载体pZC2,成功超表达了带有C端6×His标签序列的DNA双链断裂修复蛋白Mre11,进一步采用共纯化法鉴定到Mre11蛋白的作用配体Rad50,确定上述蛋白在高浓度盐(500mmol/L NaCl)中仍能形成MR复合体,表明该复合物在逆性条件下可能仍保持DNA断链修复的功能。进一步共纯化分析表明,基因组DNA片段是MR复合体形成的必需条件,在缺乏基因组DNA片段的情况下古菌分子伴侣蛋白结合并可能保护Mre11,该表达系统能够有效地应用于鉴定蛋白质的体内作用网络。
【关键词】古菌 硫化叶菌 超表达载体 Mre11蛋白 共纯化
【基金】国家自然科学基金项目(31100050,31128011)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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