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一种基于PCR技术混合样本高效定性筛查转基因阳性样本的方法

2012-01-16分类号:Q503

【作者】刘文文  郝转芳  翁建峰  李新海  宋新元  张世煌  谢传晓  
【部门】中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程  吉林省农业科学院生物技术中心  
【摘要】【目的】基于PCR技术与DNA样本混合策略建立一种高效定性筛查大量待检样本中转基因阳性样本的方法。【方法】以480个样本为研究案例,对待检样本DNA模板随机编号后构建虚拟三维混合池,置于5×96孔板中,将各板、各行和各列分别混合,构建所有板各行的X维行池(A,B,C,……G,H)和所有板各列的Y维混合池(1,2,3,……11,12),各板所有样本混合的Z维混合池(I,II,III,IV,V)。利用三维交叉唯一性原理与PCR检测的灵敏性与特异性,高效定性筛查样本中的阳性个体。将浓度为500 ng.μL-1的阳性对照分别用ddH2O和同浓度阴性DNA模板进行96倍(96×)稀释,检测该方法的灵敏性...
【关键词】转基因阳性个体  筛查  混合  PCR  高效
【基金】国家转基因重大专项(2009ZX08010-008B)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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