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大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

2012-05-15分类号:S947.3

【作者】周勇  曾令兵  孟彦  周群兰  张辉  高正勇  肖艺  孙建滨  
【部门】中国水产科学研究院长江水产研究所  中国水产科学研究院淡水渔业研究中心  华中农业大学水产学院  
【摘要】利用PCR技术扩增出大鲵虹彩病毒(giant salamander iridovirus,GSIV)主要衣壳蛋白(MCP)编码区长度为1 392 bp的片段,克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-MCP。经PCR鉴定确认正确后,以10倍梯度稀释pMD19-T-MCP重组质粒,作为标准模板进行TaqMan实时荧光定量PCR扩增,制作标准曲线,建立了大鲵虹彩病毒的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。制作的标准曲线有极好的线性关系,且线性范围宽,相关系数为0.990 19。组内重复试验的CT值标准偏差为0.52%。检测结果显示,该方法对大鲵虹彩病毒的检测有高度的特异性,与锦鲤疱...
【关键词】大鲵  虹彩病毒  主要衣壳蛋白  TaqMan实时荧光定量PCR
【基金】中国水产科学研究院淡水渔业研究中心基本科研业务费(2011JBFZ01),中国水产科学研究院基本科研业务费资助(2012A0505); 公益性行业(农业)科研专项经费(201203086)
【所属期刊栏目】水产学报
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