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贝类奥尔森派琴虫可视化LAMP检测技术的建立与应用

2012-02-28分类号:S944

【作者】庞耀珊  谢芝勋  谢丽基  谢志勤  邓显文  刘加波  彭宜  范晴  
【部门】广西壮族自治区兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室  
【摘要】根据环介导等温扩增(LAMP)技术原理,针对奥尔森派琴虫(Perkinsus olseni)的5.8 S核糖体RNA与内转录2间隔区序列,设计了6条特异性LAMP扩增引物,分别为两条外引物F3和B3、两条内引物FIP和BIP、两条环引物LF和LB。通过对反应条件的优化,建立了一种适用于贝类奥尔森派琴虫的可视化LAMP检测技术。该技术只对奥尔森派琴虫发生扩增反应,产生黄绿色荧光扩增产物,对其他对照DNA样品无扩增反应,不产生黄绿色荧光。对F3和B3外引物扩增产物进行测序分析,其序列与Gen-Bank中奥尔森派琴虫序列一致,检测结果具有高度特异性。对奥尔森派琴虫质粒DNA的最低检测量为100 fg...
【关键词】派琴虫  贝类  LAMP  荧光反应  检测
【基金】国家百千万人才工程人选专项资金项目(945200603); 广西科技攻关项目(桂科攻0630001-3M); 广西特聘专家经费资助项目(2011B020)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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