草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白在毕赤酵母中表达的初步研究
2012-11-15分类号：S943
【部门】华中农业大学水产学院 中国水产科学研究院长江水产研究所
【摘要】根据GeneBank中草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)104株VP6蛋白的全基因序列(HM234682)设计一对特异引物,以提取的GCRV-104核酸为模板,采用RT-PCR技术扩增VP6蛋白编码基因,并将其克隆到含强启动子AOXⅠ的毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZB上。重组酵母质粒pPICZB-VP6经SacⅠ线性化,电击转化到毕赤酵母KM71菌株中,Zeocin抗性平板上筛选高拷贝转化子。阳性转化子在30℃,0.5%(V/V)的甲醇添加量的条件下,连续诱导3 d,表达产物经SDS-PAGE和Western-Blotting检测,...
【关键词】草鱼呼肠孤病毒 VP6蛋白 毕赤酵母(Pichia pastoris) 表达分析
【基金】国家现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-46-11)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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