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梭鱼白细胞介素-22原核表达及活性蛋白的制备

2012-12-15分类号:S917.4

【作者】王资生  齐志涛  黄贝  张启焕  仇明  邵荣  
【部门】盐城工学院海洋技术系/江苏省沿海池塘养殖生态重点实验室  盐城工学院化学与生物工程学院  中国科学院水生生物研究所/淡水生态与生物技术国家重点实验室  
【摘要】根据梭鱼IL-22cDNA序列设计特异性引物,从梭鱼脾脏中扩增IL-22用于表达片段,连接至载体pUC57。分别以BamHⅠ和KpnⅠ对含有目的基因的质粒和pQE-30进行酶切,连接并转化到大肠杆菌M15中,以IPTG进行诱导表达。表达产物通过Ni-NTA亲和层析进行纯化。经SDS-PAGE对表达产物进行鉴定。SDS-PAGE显示该IL-22表达质粒经IPTG诱导后,IL-22重组蛋白主要在菌体培养上清中表达。通过优化蛋白表达及纯化方法,成功获得了梭鱼IL-22活性蛋白。
【关键词】梭鱼  白细胞介素-22  原核表达  蛋白纯化
【基金】江苏省自然科学基金项目(BK2011418); 江苏省省属高校自然科学基金项目(10KJB240001); 盐城工学院人才引进项目(XKR2011007)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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