鲤肠道sglt1基因的表达与抗体制备
2012-03-15分类号:S917
【部门】河南师范大学生命科学学院
【摘要】钠/葡萄糖共转运载体1(sodium/glucose cotransporter 1,Sglt1)是协助葡萄糖吸收的主要蛋白。实验首先采用RT-PCR获取sglt1基因全长,克隆至PGME-T载体进行序列及免疫原性分析,选择长度为92个氨基酸(544~637)的多肽作为目的片段(sglt1-P)),扩增sglt1-P,引入双酶切位点EcoRⅠ和HindⅢ后,连接至pET-32a(+)上,构建表达载体pET-32a(+)-sglt1-P,转化至E.coli Rosetta中,获得重组基因工程菌,通过IPTG诱导表达,获得目标多肽,并以此为抗原制备Sglt1特异性抗体。SDS-PAGE电泳分析表明...
【关键词】鲤 钠/葡萄糖共转运载体1 原核表达 ELISA 抗体效价
【基金】国家自然科学基金项目(30972252); 河南省高校科技创新杰出人才项目(2010HASTIT020); 河南省重点科技攻关项目(112102210106,112102310321)
【所属期刊栏目】水产学报
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