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细粒棘球绦虫Hsp70基因的克隆、表达及抗体制备

2012-06-16分类号:S852.7

【作者】赵莉  陈皓斐  张文宝  马正海  张壮志  张旭  古努尔·吐尔逊  米晓云  金映红  薛晶  石保新1  
【部门】新疆畜牧科学院兽医研究所  新疆大学生命科学与技术学院/新疆生物资源基因工程国家重点实验室  新疆疾病预防控制中心免疫规划科  
【摘要】【目的】克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体。【方法】从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株。通过改变诱导温度、IPTG浓度和诱导时间筛选出EgHsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件。并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白。纯化蛋白经皮下多点注射免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blotting检测血清效价和特异性。【结果】RT-PCR扩增获得EgHsp70...
【关键词】细粒棘球绦虫  热休克蛋白家族基因Hsp70  抗血清
【基金】公益性行业(农业)科研专项项目(200903035-12)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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