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鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS1的原核表达及纯化

2012-12-28分类号:S852.65

【作者】赵冬敏  黄欣梅  刘宇卓  张敬峰  韩凯凯  谢星星  周晓波  李银  
【部门】江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心  
【摘要】根据鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS1基因序列,设计1对特异性引物,利用PCR方法扩增得到完整的NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a和pET32a上,构建出重组表达质粒pET28a-NS1和pET32a-NS1,转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导得到NS1融合蛋白(His-NS1),其分子质量约分别为44,58 kDa,均在诱导后6 h达到表达量高峰。分析显示,2种融合蛋白均以包涵体形式存在,包涵体经过变性和复性后均可获得单一、高表达量的目的蛋白,为进一步开展关于鹅坦布苏病毒NS1蛋白的研究奠定了基础。
【关键词】鹅坦布苏病毒  NS1蛋白  原核表达
【基金】江苏省自然科学基金项目(BK2012376); 国家自然科学基金项目(31172345); 江苏省农业科技自主创新资金项目(cx(11)4039)
【所属期刊栏目】华北农学报
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