猪源Mx1基因的原核表达及其抗血清制备
2012-01-30分类号:S828
【部门】南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京可莱威饲料有限公司
【摘要】利用1对特异性引物,从pT-poMx1中扩增出Mx1基因开放式阅读框(1 992 bp),并将其编码区插入到携带GST标签的原核表达载体pGEX-6p-1中,经酶切和序列测定后,重组质粒pGEX-poMx1转化入大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导表达融合蛋白并分析表达效果。结果表明:经终浓度为0.8 mmol.L-1 IPTG诱导后4 h,猪源Mx1基因(poMx1)在BL21(DE3)中获得高效表达,表达量占菌体蛋白的32.6%,SDS-PAGE显示融合蛋白相对分子质量为99×103。将目的蛋白切胶后免疫Balb/c小鼠,制备了特异性多抗血清,Western blot结果显示该抗血...
【关键词】猪源Mx1基因 原核表达 抗血清
【基金】国家自然科学基金青年基金项目(31001062); 江苏高校优势学科建设工程资助项目
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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