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光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化

2012-12-20分类号:S792.15

【作者】陈争  姜小凤  童再康  
【部门】浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地  
【摘要】为获得稳定的聚合酶链式反应(PCR)产物,采用正交设计L25(56)对光皮桦Betula luminifera表达序列标签-简单重复序列聚合酶链式反应(EST-SSR PCR)反应体系中的5个因素:DNA模板浓度,引物浓度,镁离子(Mg2+)浓度,三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs)浓度和DNA聚合酶量进行优化,每个因素设计5个水平。优化试验结果表明:光皮桦EST-SSR最佳PCR反应体系:4.0 mg.L-1DNA模板,0.500μmol.L-1引物,1.250 mmol.L-1Mg2+,0.250mmol.L-1dNTPs,0.072 5×16.67 mkat.L-1rTaq酶。通过梯度PC...
【关键词】林木育种学  光皮桦  EST-SSR  PCR反应体系  正交设计
【基金】浙江省重大科技专项(2008C02004-1)
【所属期刊栏目】浙江农林大学学报
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