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基于毛细管电泳的柳树AFLP分子标记研究

2012-01-15分类号:S792.12

【作者】吕金辉  胡建军  卢孟柱  
【部门】林木遗传育种国家重点实验室中国林业科学研究院林业研究所  
【摘要】为构建柳树遗传图谱、进行分子育种等奠定基础,以柳树为材料,基于毛细管电泳技术体系建立并优化了AFLP分子标记技术,简化了AFLP分析流程。首先提取高质量的柳树基因组DNA,对基因组进行酶切与接头连接、预扩增和选择性扩增,最后通过毛细管电泳分析各因素的影响。基因组DNA提取采用改进的CTAB法,酶切模板DNA用量450ng,EcoRⅠ酶切2h,MseⅠ酶切2h,接头过夜连接,选择性扩增时dNTP浓度0.3mmol/L,Mg2+浓度1.5mmol/L,引物浓度0.125μmol/L,DNA聚合酶浓度0.025U/μL,预扩增产物最适稀释倍数20倍。经过重复实验,证明建立的AFLP-毛细管反应体系适...
【关键词】柳树  AFLP  毛细管电泳
【基金】“863”国家高技术研究发展计划项目(2011AA100201); 转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08011-027B)
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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