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杨树溃疡病病原的多重PCR检测技术

2012-05-15分类号:S763.7

【作者】冯小慧  张星耀  严东辉  
【部门】中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 国家林业局森林保护学重点实验室  
【摘要】利用真菌通用引物ITS1/ITS4,EF1-728F/EF1-986R对4种杨树溃疡病病原菌株和环境样本的核糖体DNA内部转录间隔区ITS序列和转录延伸因子EF-1α基因序列分别进行普通和多重PCR检测,再进行测序比对分析。结果表明:退火温度为55.6℃,各引物终浓度为0.2μmol·L-1,可以成功地扩增出菌株和环境样本的目的条带,并通过测序比对鉴定出多种来自培养和环境病害组织中的溃疡病病菌,多重PCR能够检测到1ng的基因组DNA。研究结果将为建立溃疡病病原多重PCR鉴定技术和以环境溃疡病病害样本为直接检测鉴定对象的高通量的基因芯片检测方法奠定基础。
【关键词】杨树溃疡病  多重PCR  病原鉴定  环境样本
【基金】引进国际先进林业科学技术项目“检测性生物芯片平台及其微生物检测新技术引进”(2008-4-28)
【所属期刊栏目】林业科学
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