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蛇皮果基因组DNA提取及其RAPD条件优化

2012-07-20分类号:S667.9

【作者】李建光  李荣生  李发根  尹光天  杨锦昌  邹文涛  
【部门】中国林业科学研究院热带林业研究所  
【摘要】以蛇皮果顶梢嫩叶为材料,比较了CTAB法、改良CTAB法、CTAB-free法和SDS法对基因组DNA的提取效果,并对蛇皮果RAPD反应体系进行优化。结果表明,CTAB法、改良CTAB法和CTAB-free法均能提取出蛇皮果基因组DNA,其中NaCl浓度为5 m ol/L的改良CTAB法因可更有效地去除多糖及酚类物质,并能满足PCR扩增的要求而被认为是蛇皮果基因组DNA提取的最适方法;在15μL的PCR扩增体系中,Mg2+、dNTPs和Taq DNA聚合酶的最优浓度分别为1.4 mmol/L、0.12 mmol/L和0.12 U/μL;PC R反应程序的最适退火温度为39℃。
【关键词】蛇皮果  DNA提取  RAPD优化
【基金】中央级公益性科研院所基本科研业务费专项项目“蛇皮果栽后遮荫;灌溉技术研究”(编号:RITFKYYW2010-02); 国家林业局948引进项目“蛇皮果栽培品种及配套栽培技术引进”(编号:2007-4-11)
【所属期刊栏目】中南林业科技大学学报
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