肥城桃果实乙烯受体ETR1蛋白重组条件优化及NO对ETR1基因表达的影响
2012-12-28分类号:S662.1
【部门】山东农业大学化学与材料科学学院
【摘要】克隆与肥城桃成熟有关的乙烯受体ETR1基因片段,优化ETR1的表达条件,获得ETR1重组蛋白,为进一步研究ETR1功能并改善肥城桃贮运性能奠定基础。以肥城桃成熟果实总RNA反转录cDNA为模板,经PCR扩增得到特异片段,将该片段连接到质粒,经双酶切后,连接至质粒并转染至表达载体,IPTG诱导,优化表达条件。并以cD-NA为模板,进行实时荧光定量PCR,测定外源NO对ETR1相对表达量的影响。序列分析结果表明,该序列与Gen-Bank中的AF124527的cDNA序列同源性为99%,氨基酸序列同源性为99%。优化蛋白表达条件为:IPTG最佳浓度为0.5 mmol/L,最适温度为30℃,最适诱导时...
【关键词】肥城桃 乙烯受体 ETR1 基因克隆 重组蛋白
【基金】国家自然科学基金(30871756); 山东农业大学博士后科研业务费(76246)
【所属期刊栏目】华北农学报
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