alfAFP和spCEMA融合基因表达载体的构建及其对小麦的遗传转化
2012-10-15分类号:S512.1
【部门】西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室 西北农林科技大学农学院 西北农林科技大学植物保护学院
【摘要】以小麦品种西农1376为受体,利用Overlapping PCR的方式构建了防御素基因alfAFP和抗菌肽基因spCEMA融合基因的表达载体,与pAHC20共转化幼胚愈伤组织,获得转基因再生T0代植株269株,春化后移栽成活188株。对叶片基因组DNA进行目的基因和bar基因PCR扩增表明其中7株是共整合植株,共整合频率为0.1%,初步证明融合基因已成功通过共转化方式导入受体小麦品种中。影响共整合率的因素分析表明,在使用除草剂PPT对bar基因进行筛选的过程中,筛选时间的缩短并不会明显降低筛选的效率。
【关键词】小麦 转基因 融合基因 共转化
【基金】国家重大专项(2011ZX08002-001); 高等学校学科创新引智计划资助项目(B07049)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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