葡萄卷叶伴随病毒3号抗血清的制备及应用
2012-08-15分类号:S436.631.1
【部门】中国农业大学农学与生物技术学院果树系/北京市果树逆境生理实验室
【摘要】为获得特异性抗血清用于批量检测葡萄苗木中的葡萄卷叶伴随病毒3号(Grapevine leafroll associatedvirus 3,GLRaV-3),本研究用含有GLRaV-3CP蛋白基因的载体pMD18-CP为模板,PCR扩增CP蛋白基因。将PCR产物定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选得到阳性克隆pET-G3CP。用终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析显示,GLRaV-3CP在大肠杆菌中得到高效表达。纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。经分析,抗血清效价为1/214,试验结果显示,此抗血清能用于葡萄植株样品...
【关键词】葡萄融合蛋白 ACP-ELISA Western blot 分离物
【基金】现代农业产业技术体系建设专项(CARS-30-bc-1)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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