丁香假单胞菌极毛蛋白hrpA基因的克隆与表达
2012-09-18分类号：S432.4
【部门】福建农林大学生命科学学院 福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室
【摘要】将丁香假单胞菌番茄变种DC3000(P.syringae pv.tomato DC3000)极毛蛋白hrpA基因克隆到pET32a(+)载体上,获得重组表达载体pET32a(+)-hrpA.将重组质粒转入宿主E.coli BL21(DE3)溶源菌中,通过SDS-PAGE分析表明,在1.0mmol.L-1异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)的诱导下,重组子成功表达了分子质量约为28 ku的融合蛋白(目标蛋白基因与硫氧还蛋白基因的融合表达产物).并利用Ni2+-NTA柱亲和层析分离获得纯化的HrpA蛋白,质量浓度为91.8 g.L-1.
【关键词】丁香假单胞菌 hrpA基因 融合蛋白 表达 纯化
【基金】国家自然科学基金资助项目(30771400); 福建省自然科学基金资助项目(2009J06008,2011J05049)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
文献传递
