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β-葡萄糖苷酶bglⅠ基因在粟酒裂殖酵母中的表达及功能分析

2012-11-20分类号:S216.2;S182

【作者】付永平  李博  王丕武  高玮  夏海丰  张卓  
【部门】吉林农业大学农学院  吉林市农业科学院  通化市农业科学院  
【摘要】【目的】克隆绿色木霉β-葡萄糖苷酶bglⅠ基因,并在粟酒裂殖酵母细胞中进行表达分析。【方法】利用PCR技术,从绿色木霉中克隆纤维素酶β-葡萄糖苷酶bglⅠ基因的DNA序列,再通过XhoⅠ和NotⅠ2个酶切位点与粟酒裂殖酵母表达载体pREP5N连接,构建酵母真核表达载体,利用电转化方法转化粟酒裂殖酵母SP-Q01细胞,并在SP-Q01中进行表达分析,最后采用DNS法测定表达产物的酶学活性。【结果】PCR扩增得到2 380bp的bglⅠ基因序列,包括完整的CDS序列和信号肽序列,编码序列与已报道的里氏木霉纤维素酶基因序列相似性为100%;对酵母转化子进行诱导培养后,SDS-PAGE电泳检测得到大小...
【关键词】绿色木霉  β-葡萄糖苷酶  粟酒裂殖酵母  酶学活性
【基金】国家自然科学基金面上项目(31171568); 吉林农业大学博士科研启动基金项目(201202)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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