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Arkadia和UCH37表达载体的构建及其对TGF-β1/Smads信号通路的影响

2012-05-01分类号:R363

【作者】廖芳芳  苑嗣纯  张中文  吴国娟  
【部门】北京农学院动物科技学院  
【摘要】【目的】构建泛素启动酶Arkadia和泛素羧基末端水解酶-5(亦称UCH37)的表达载体,并探讨Smad7蛋白的泛素化修饰对马兜铃酸肾病中TGF-β1/Smads信号通路的影响。【方法】通过观察绿色荧光的表达量及real-time PCR反应优化转染条件,转染Arkadia和UCH37 siRNA,real-time PCR检测mRNA表达抑制率。分别构建Arkadia和UCH37的表达载体pGPU6/GFP/Neo,经鉴定后转染细胞,real-time PCR和Western blotting检测Arkadia、UCH37和Smad7的表达变化。【结果】①30 pmol siRNA和1.5μ...
【关键词】Arkadia基因  UCH37基因  转染  表达载体  TGF-β1/Smads信号通路
【基金】国家自然科学基金项目(31172362,30972215); 北京市自然科学基金项目(6092004,5102014); 北京市属高校人才强教计划项目(PHR)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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