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牛肌肉生长抑制素基因敲除打靶载体的构建

2012-01-16分类号:Q78;S823

【作者】赵丽华  梁浩  云亭  李荣凤  
【部门】内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室  
【摘要】【目的】构建两套用于牛肌肉生长抑制素(myostation,MSTN)基因敲除的置换型打靶载体。【方法】设计并合成含有限制性内切酶酶切位点的引物,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)以牛耳皮肤组织基因组DNA为模板分别扩增出两套打靶载体的同源短臂和长臂,再分别插入到两套打靶专用基础载体pMCS-PLP和PⅢ中,构建两套用于牛MSTN基因敲除的置换型打靶载体pPLP-MSTN和PⅢ-MSTN。【结果】经过PCR、T载体连接和DNA测序,证实载体pPLP-MSTN包含2.8 kb同源短臂和4.0 kb同源长臂,载体PⅢ-MSTN包含1.3 kb同源短臂和...
【关键词】牛  生长抑制素基因  基因敲除打靶载体  胎儿成纤维细胞
【基金】国家“863”计划项目(2009AA10Z111); 农业部转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08007-002); 内蒙古自治区自然科学基因资助项目(2009ZD02)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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